使用C18柱的循環(huán)制備純化案例 三萜皂苷
色譜條件:
色譜柱為C18柱（直徑20×長500mm）；流動相乙腈:甲醇（3∶2）；體積流量5mL/min；柱溫：室溫；檢測波長210 nm和RI檢測器；進樣量6mL。

上：紫外譜圖；下：RI譜圖

色譜分離:
將待分樣品溶于流動相乙腈:甲醇（3∶2），采用 ODS  C18色譜柱分離，分別用UV 檢測器及RI檢測器檢測峰信號（見上）。樣品通過色譜柱時檢測到4 個峰信號，保留時間為50～85min。在保留時間為50 min 時啟動儀器的循環(huán)系統(tǒng)，不收集組分，這樣可以把前面的雜質峰除去，只保留樣品峰，從而單獨使樣品在整個系統(tǒng)中循環(huán)一次，相當于樣品兩次通過C18色譜柱，進行兩次分離。在保留時間為100 min 時根據(jù)峰信號開始收集各組分。
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